Cum de a endospore pete
O endospore este o formă latentă a bacteriei care îi permite să supraviețuiască condițiilor de mediu slabe. Pata de spori este o pată diferențiată utilizată pentru a detecta prezența și locația sporilor în anumite bacterii. Mai multe bacterii, în special cele ale genului Bacillus și Clostridium, sunt cunoscute pentru a produce endospores. Endospore colorarea este utilizată în scopul diferențierii și clasificării bacteriilor. Este, de asemenea, foarte important în medicina și industria alimentară. Deoarece acestea sunt greu de distrus, este imperativ să se determine dacă sunt prezenți în alimente conservate și, astfel, evitarea bolilor pentru a proteja cumpărătorii.
Pași
1. Pregătiți-vă pentru experiment prin punerea mănușilor, purtând un strat de laborator și colectarea materialelor. Vedeți lucrurile pe care le veți avea nevoie mai jos pentru referință. Apucați un diapozitiv și clătiți-l cu săpun și apă. Utilizați hârtie bibuloasă pentru a usca diapozitivul. Utilizați un negru Sharpie pentru a desena un cerc pe fundul diapozitivului pentru a identifica zona pentru care bacteriile vor fi murdare.
- Imbracaminte importante de laborator constă din ochelari de protecție, încălțăminte închisă, mănuși și haina de laborator.
2. Flacără bucla de inoculare și așteptați 10 secunde înainte de a plasa bucla în pipetă de bacterii.
3. Configurați un arzător Bunsen pe suportul inelului cu clema inelului și o tifon de sârmă peste el.
4. Umpleți-vă cu apa de la robinet până când este de aproximativ jumătate. Așezați canalul de pe partea de sus a tifonului de sârmă de pe clema inelului.
5. Porniți arzătorul Bunsen pentru a încălzi / fierbe apa.Lăsați aburul să apară înainte de a pune diapozitivul pe cutie.Așezați diapozitivul cu frotiu deasupra canalului.
6. Așezați o bucată de prosop de hârtie pe partea superioară a frotului de pe diapozitiv și dărâmă prosopul de hârtie cu colorantul verde de malachit.
7. Abur frotiu peste apă timp de 5 minute.
8. Lăsați diapozitivul să se răcească, scoateți hârtia și clătiți cu apă timp de 30 de secunde.
9. Adăugați Safranin la diapozitiv timp de 1 minut. Paharul de plastic poate fi folosit pentru a scurge colorantul în exces.
10. Clătiți de pe Safranin cu apă pentru a elimina vopsirea în exces. Ștergeți diapozitivul între foile de hârtie bibuloasă să se usuce. După uscarea diapozitivului, acesta poate fi examinat sub microscop.
11. Vizualizați diapozitivul. Puneți-o pe scenă. Pentru acest tip de pată, bacteriile pot fi vizualizate numai la cel mai înalt obiectiv (100x), cunoscut sub numele de lentilă de imersie de ulei. Acest ulei sporește rezolvarea puterii și va permite lumina să se concentreze perfect pe specimen.
12. Examinați diapozitivul pentru a vedea endosporele. Celula vegetativă va apărea roșu / roz, în timp ce endosporele în sine este verde colorat. Sporii pot fi localizați terminale, mijlocii sau subterminale în interiorul celulei vegetative.
Lucrurile de care veți avea nevoie
- Bacteriile adecvate care produc endospores
- Malachit Green
- Safranin
- Microscop diapozitive
- arzător Bunsen
- Standuri de inel
- Inocularea buclă
- Plasă de sârmă
- Poate sa
- Microscop
- Hârtie bibulă
sfaturi
Citiți cu atenție instrucțiunile.
Asigurați-vă că nu faceți ca frotiul prea gros, deoarece acest lucru va cauza complicații în a vedea endosporele.
Acordați atenție timpului în timpul experimentului.
Avertizări
Dacă se rupe sticlă, aruncați sticlă și bacterii prin mijloace adecvate. De asemenea, asigurați-vă că urmați procedurile de protocol adecvate în orice moment în ceea ce privește echipamentele de uzură și manipulare a laboratorului.
Partajați pe rețeaua socială: